أولا: التعليمات.
1- يجب أن يمتنع المريض عن أخذ اي مضاد حيوي لمدة 48 ساعة .
1- يجب أن يمتنع المريض عن أخذ اي مضاد حيوي لمدة 48 ساعة .
2- يجب إعطاء المريض عبوة معقمة حتى يجمع بها البول, ويفضل أول بول فى الصباح.3- يغسل المريض يدية بالماء والصابون وأيضا منطقة الحوض والأعضاء التناسلية بواسطة الديتول وهو مطهر ثم غسلها مرة أخرى بالماء النقى للتخلص من أثر المطهر ثم ينشفها.4- يترك أول قطرات من البول خارج الإناء المخصص وباقى عينة البول فى الإناء المخصص أو العبوة المخصصة ويقوم بتجميع البول حتى نصف العبوة
5- يحضر العينة للمعمل في أقل من 15 دقيقة.
ثانيا: عمل المزرعة.
1- يتم إزابة ال nutrent agar في حمام مائي .
2- صب الميديا في الطبق تحت ظروف معقمة (بجوار لهب).
3- بإستخدام اللوب بعد تعقيمة بالنار (بواسطه لهب) يتم غمسه بعينة البول ويتم زراعته فى الأجار.
4- وضعه لمدة 24 ساعة في الحضانة عند 36 درجة مئوية.
5- لو نمت البكتريا ... إذا ستكمل الإختبار بعمل إختبار الحساسية وتحديد نوع البكترى
واذا لم تنمو ستكون نتيجة المزرعة سلبية .
6- نقوم بصبغ العينة لو كانت النتيجة إيجابية وهى وجود بكتريا فى عينة البول.
خطوات عملية الصبغ:
- يتم تحضير العينة وذلك بوضع نقطة مياه على شريحه نظيفه وأخذ جزء بسيط بواسطة
اللوب من البكتيريا المزروعه بالطبق الذى تم زرعه..وفردها جيدا فى منتصف
الشريحه..ويراعى أن يكون الفيلم خفيف ليكون أسهل فى الفحص...ثم نترك الشريحه
لتجف فى درجة حرارة الغرفه.. بعد ذلك يتم تمرير الشريحه على اللهب بشكل سريع
أربع مرات بإتجاه واحد.
- نصبغ الشريحه بواسطة صبغة جرام.
- بعد ذلك يتم فحص الشريحه بواسطه الميكروسكوب بواسطه العدسه الزيتيه (Oil immersion) من حيث الشكل وهل هى موجبه الجرام(تظهر باللون الأزرق) أم سالبه الجرام (تظهر باللون الأحمر)
7- تأخذ مسحة من البكتريا وتذوبها في أنبوبة بها ماء معقم وترج حتى تذوب وتعكر
الماء وهذا يسمى بال (spore suspension ) .
8- تحضر طبق أجار كالسابق .
9- تصب الspore suspension في الطبق بشكل متجانس حتى يملئ كل الطبق
بشكل متساوي.
10- تنتظر حتى يجف قليلا .
11- تقوم بغرس14-18ديسك من المضادات الحيوية وهى جاهزة للإستعمال مباشرة بواسطة ماسك خاص. 12- نضع الطبق لمدة 24 ساعة أخرى فى الحضانة ثم تسجل
أكبر منطقة قامت فيها أقراص المضادات الحيوية بالقضاء على البكتريا وتعرف ب ( (inhibition zone ونستنتج منها نوع المضاد الحيوى الأكثر تاثيرا على البكتريا
13- نقوم بكتابة تقرير مفصل عن نوع البكتريا الموجود فى عينة تحليل البول ونوع المضاد
الحيوى الأكثر تأثيراًعلى البكتريا.
5- يحضر العينة للمعمل في أقل من 15 دقيقة.
ثانيا: عمل المزرعة.
1- يتم إزابة ال nutrent agar في حمام مائي .
2- صب الميديا في الطبق تحت ظروف معقمة (بجوار لهب).
3- بإستخدام اللوب بعد تعقيمة بالنار (بواسطه لهب) يتم غمسه بعينة البول ويتم زراعته فى الأجار.
4- وضعه لمدة 24 ساعة في الحضانة عند 36 درجة مئوية.
5- لو نمت البكتريا ... إذا ستكمل الإختبار بعمل إختبار الحساسية وتحديد نوع البكترى
واذا لم تنمو ستكون نتيجة المزرعة سلبية .
6- نقوم بصبغ العينة لو كانت النتيجة إيجابية وهى وجود بكتريا فى عينة البول.
خطوات عملية الصبغ:
- يتم تحضير العينة وذلك بوضع نقطة مياه على شريحه نظيفه وأخذ جزء بسيط بواسطة
اللوب من البكتيريا المزروعه بالطبق الذى تم زرعه..وفردها جيدا فى منتصف
الشريحه..ويراعى أن يكون الفيلم خفيف ليكون أسهل فى الفحص...ثم نترك الشريحه
لتجف فى درجة حرارة الغرفه.. بعد ذلك يتم تمرير الشريحه على اللهب بشكل سريع
أربع مرات بإتجاه واحد.
- نصبغ الشريحه بواسطة صبغة جرام.
- بعد ذلك يتم فحص الشريحه بواسطه الميكروسكوب بواسطه العدسه الزيتيه (Oil immersion) من حيث الشكل وهل هى موجبه الجرام(تظهر باللون الأزرق) أم سالبه الجرام (تظهر باللون الأحمر)
7- تأخذ مسحة من البكتريا وتذوبها في أنبوبة بها ماء معقم وترج حتى تذوب وتعكر
الماء وهذا يسمى بال (spore suspension ) .
8- تحضر طبق أجار كالسابق .
9- تصب الspore suspension في الطبق بشكل متجانس حتى يملئ كل الطبق
بشكل متساوي.
10- تنتظر حتى يجف قليلا .
11- تقوم بغرس14-18ديسك من المضادات الحيوية وهى جاهزة للإستعمال مباشرة بواسطة ماسك خاص. 12- نضع الطبق لمدة 24 ساعة أخرى فى الحضانة ثم تسجل
أكبر منطقة قامت فيها أقراص المضادات الحيوية بالقضاء على البكتريا وتعرف ب ( (inhibition zone ونستنتج منها نوع المضاد الحيوى الأكثر تاثيرا على البكتريا
13- نقوم بكتابة تقرير مفصل عن نوع البكتريا الموجود فى عينة تحليل البول ونوع المضاد
الحيوى الأكثر تأثيراًعلى البكتريا.
